Guanidine Hydrochlorideâ € â € ref € بازپرداخت پروتئین ، حل کننده پروتئین

        در فرآیند بازسازی مجدد پروتئین، ابتدا پروتئین بدن گنجانده شده باید حل شود. پروتئین بدن شامل تجمع پروتئین هایی است که توسط باکتری ها در سلول ها بیان می شود تا ذرات جامد غیرفعال را تشکیل دهند که آمورف و نامحلول در آب هستند و فقط در مواد دناتوره کننده مانند اوره و حل می شوند.هیدروکلراید گوانیدین.

پس از آن، عامل دناتوره کننده به آرامی حذف می شود تا پروتئین مورد نظر از حالت کشش کامل دناتوره شده به ساختار چین خورده طبیعی بازگردانده شود، در حالی که عامل احیا کننده حذف می شود تا امکان تشکیل طبیعی پیوندهای دی سولفیدی فراهم شود. به طور کلی، روند renaturation ازهیدروکلراید گوانیدیناز 4M شروع می شود و 1.5M به پایان می رسد. چندین روش مختلف وجود دارد:

رقیق کردن و باز شدن: مستقیماً آب یا بافر را برای رقیق شدن محلول اضافه کنید و بگذارید یک شب بماند تا پروتئین رسوب کند. نقطه ضعف این است که حجم بسیار افزایش می یابد ، سرعت رقیق سازی خنثی کننده بسیار سریع است و کنترل آن دشوار است. دیالیز یا بازتولید مجدد اولترافیلتراسیون: هر دو خنثی کننده مواد مولکولی کوچک می توانند در طی دیالیز یا فوق فیلتراسیون به تدریج به غشای متخلخل نفوذ کنند ، به طوری که غلظت دناتوراتور محلول پروتئینی دناتوره شده به تدریج کاهش می یابد و در نهایت برداشته می شود ، به طوری که پروتئین دناتوره شده چین خورده و مجدداً بسته می شود. مزیت آن این است که حجم را افزایش نمی دهد. میزان حذف دناتورانت با کاهش تدریجی غلظت نفوذپذیر خارجی کنترل می شود ، اما این فرآیند کند و زمان بر است. renaturation روی ستون: renaturation در فرایند کروماتوگرافی به دست می آید ، که اخیراً مورد مطالعه قرار گرفته و با موفقیت انجام شده است. روش بازپرداخت مورد استفاده در تولید. مزیت این است که ظرفیت جذب تثبیت کروماتوگرافی در مقایسه با پروتئین دناتوره شده نسبتاً پایین است ، که می تواند کیفیت بازپرداخت و عملکرد را بهبود بخشد. در عین حال ، می تواند پروتئین هدف و پروتئین ناخالص را برای دستیابی به هدف تصفیه جدا کند. و بازیابی دناتورانس راحت است.

پروتئین یک ماکرومولکول بیولوژیکی مرتبط با زندگی است، یک ماده ضروری برای حفظ پیشرفت طبیعی زندگی و همچنین کد نسل دوم وراثت حیات است. تحقیقات مختلف در مورد پروتئین نیز موضوعی است که بیشتر مورد توجه مردم است و تحقیق در مورد ساختار آن نیز برای پیشرفت پزشکی بسیار مهم است. دناتوره شدن یا تبدیل مجدد پروتئین یکی از موضوعات اصلی در تحقیقات علوم زیستی است. در میان آنها، دناتوره کنندههیدروکلراید گوانیدینمی تواند نه تنها پروتئین را تغییر رنگ دهد ، مطالعه ساختار آن را تسهیل کند ، بلکه پروتئین گنجانده شده بدن را نیز در طی فرآیند تجدید رنگ حل کند. نقش اساسی در پژوهش ایفا کرد.